Linbio 血RNA提取试剂盒

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产品信息

产品组成

储存条件

室温（15-30℃）干燥条件下，可保存18个月。

注意事项

1.第一次使用时，在Buffer W1A concentrate和Buffer W2 concentrate中按试剂瓶上指定体积加入无水乙醇或95%乙醇。

2. Buffer含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。

实验准备

RNA提取的关键在于防止RNase污染。RNase在环境中普遍存在，且极为稳定，痕量 RNase即可迅速降解RNA，因此，需要做好防护措施：

1. 戴一次性干净手套；在单独洁净的区域操作；戴口罩并在操作过程中避免讲话。通过以上办法可有效防止实验者汗液、唾液中的RNase污染。

2. 使用RNase-free的实验器具，包括枪头和离心管。

操作步骤

1. 200-400ul全血加1-2ml Buffer RL在离心管中混匀。

说明：如果血样的体积在200-400μl之间，适当调整加入Buffer RL的体积。

2. 冰浴10-15min。冰浴期间，温和混匀2次。4℃，3,000Xg离心5 min。

3. 用吸头尽可能吸取丢弃上相。

4. 加0.5 ml(血样体积200 ul)-1ml(血样体积400 ul) Buffer RL，温和混匀，冰浴5 min。

说明：如果血样的体积在200-400 ul之间，适当调整加入Buffer RL的体积。

5.  4℃，3,000xg离心5min，弃上清。

6. 加400 ul Buffer R-I，用吸头抽吸，混合均匀。

7. 加 200 ul Buffer R-II，旋涡振荡1 min, 4℃ 12,000xg离心10 min。

8. 取上清至2mI离心管中(试剂盒内提供)。加250μl异丙醇，混合均匀。

9. 将制备管置于2mI(试剂盒内提供)离心管中，转移步骤8中的混合液到制备管中，4℃，6,000xg离心1min。

10. 弃滤液，将制备管置回2ml离心管中，制备管中加700 ul Buffer W1A，12,000xg离心1 min。

说明：确认在Buffer W1A concentrate 中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。

11. 弃滤液，将制备管置回到 2 ml离心管中，在制备管中加700 ul Buffer W2，12,000Xg离心1min；以同样的方法再用700 ul Buffer W2洗涤一次。

说明：确认在Buffer W2 concentrate中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。

12. 弃滤液，将制备管置回到2ml离心管中，12,000Xg离心1min。

13. 将制备管放入一洁净的1.5mI离心管(试剂盒内提供)中，在制备管膜中央加60-100ul Buffer TE(DNase & RNase-free)。室温静置1 min，12,000Xg离心1 min，洗脱得RNA。