Linbio 病毒DNA/RNA提取试剂盒
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本试剂盒采用制备膜选择性地吸附DNA/RNA的方法达到快速纯化病毒DNA/RNA的目的。适合于从200u体液(包括血浆,血清,腹水,培养细胞上清液,脑脊髓液,尿液,脱落细胞悬浮液等)中提取高纯度的病毒 DNA/RNA,用于PCR/RT-PCR、测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分子生物学实验。
储存条件
室温(15-30℃)干燥条件下,可保存18个月。 -
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产品信息
货号
名称
规格
LN102001
Linbio 病毒DNA/RNA提取试剂盒
50次
LN102002
Linbio 病毒DNA/RNA提取试剂盒
200次
产品组成
组分
50次
200次
储存条件
Buffer V-L
12 ml
48 ml
15-30℃
Buffer V-N
4 ml
16 ml
15-30℃
Buffer W1
24 ml
96 ml
15-30℃
Buffer W2
24 ml
96 ml
15-30℃
Buffer TE
4 ml
16 ml
15-30℃
纯化柱
50
200
15-30℃
2ml离心管
100
400
15-30℃
1.5ml离心管
50
200
15-30℃
储存条件
室温(15-30℃)干燥条件下,可保存18个月。
注意事项
Buffer R1含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
1. 病毒具有很强的感染能力,操作前必须准备好各种防御措施。
2. 操作时严格按操作步骤进行,废物必须放入含消毒液的废物缸,以免污染实验室和工作人员。
3. 操作过程中避免其他核酸污染和RNA降解,使用不含DNA、RNA和Rnase的离心管、吸管、Tip头、试剂和手套,工作人员戴口罩进行操作。
4. 缓冲液中含刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤、眼睛和衣服,谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
实验准备
1. 第一次使用时,在BufferW1和BufferW2 中按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
2. 准备异丙醇(1%冰乙酸):在99 ml异丙醇中加1ml冰乙酸,混合均匀,室温密闭贮存。
操作步骤
以下操作步骤是从200 血清中提取病毒 DNA/病毒RNA为例而设计的,从其他体积的样品中提取病毒核酸可按比例加 Buffer V-L,Buffer V-N 和异丙醇(1%冰乙酸),以后步骤中的 Buffer用量不变。
1. 收集200样品,转入1.5mI离心管中。
说明:如果样品中有细菌或细胞污染,可先12,000Xg离心5min,取上清200ul作为样品。
2. 加200ul Buffer V-L,漩涡振荡混合均匀,静置5 min。
3. 加75ul Buffer V-N,漩涡振荡混合均匀,12,000Xg离心5min。
4. 将上清转移到新的2 mI离心管中,加 300μl异丙醇(1%冰乙酸),上下倒置6-8次,混合均匀。
5. 将制备管置于2 mI离心管中,取步骤4中的混合液移入制备管中,6,000Xg离心1min。
6. 弃滤液,将制备管置回到 2mI离心管中,加500 ul Buffer W1,室温静置1min。12,000Xg离心1 min。
说明:确认在 Buffer W1 中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
7. 弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,加800 ul Buffer W2,12,000Xg离心1min。
说明:确认在Buffer W2 中已按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇。
8. 将制备管置回到2ml离心管中,12,000Xg离心1min。
9. 将制备管置于洁净的1.5 mI离心管中,在制备管膜中央加40-60ul Buffer TE (nuclease-free),室温静置1 min。12,000Xg离心1 min 洗脱DNA/RNA。
说明:纯化病毒RNA时,建议在洗脱液中加入RNasin,浓度为1unit /ul。
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